Indução De Calos Embriogênicos A Partir De Brotos De Bananeira (musa Spp.)
- Por Carlos Alan Couto
- Publicado 5/11/2007
- Agricultura , Biologia
- Sem avaliações
2. Preparação das culturas múltiplas de meristema
No início da cultura, foram utilizados brotos simples in vitro. Estes foram cortados e reduzidos a 0,5 cm sobre o meristema apical, inoculados em tubos de ensaio de 150 ml com 15 ml meio de multiplicação inicial, constituído de sais e vitaminas do MS (Murashige & Skoog, 1969) suplementado com 10 µM 6-benzylaminopurine (BAP), 1 µM ácido indolacético (AIA), 10 ácido ascórbico de mg.L-1, 30 sacarose de g.L-1, e solidificado com 3 g.L-1 Phytagel®. O pH do meio de cultura foi ajustado para 6,2 e autoclado por 20 minutos a 121°C.
Depois de um mês de cultura (1 ciclo), com a formação de brotos, estes foram selecionados, cortados e transferidos para o mesmo meio fresco. A cultura de brotos foi mantida em sala de crescimento com temperatura de 26 ± 2°C e com fotoperíodo de 16 horas. Depois de 2 ciclos de cultura os brotos múltiplos foram transferidos para o mesmo meio de cultura acrescentando 100 µM BAP cultivados no escuro. Os explantes foram subcultivados mensalmente
RESULTADOS
Os genótipos Pacovan (AAB) e Lidi(AA), que foram estabelecidos, apresentaram bom desenvolvimento, pouca oxidação e ausência de contaminação nos explantes.
Os genótipos: Terra (AAB), 0116-01 e calcutta quando submetidos a preparação das culturas múltiplas de meristema, apresentaram plantas pequenas e muita oxidação. As cultivares Grande Naine (AAA) e Maçã (AAB) apresentaram bons resultados em todas as etapas.
Os brotos estão sendo cultivados no escuro seguindo o protocolo proposto até a formação de grupos meristemáticos e posteriormente serão transferidos para meio de cultura apropriado para indução de embriogênese e estabelecimento de suspensão celular das variedades utilizadas.
Futuramente o calos formados serão testadas em varias concentrações de 2,4-D (1, 5, 10, 20 e 50 mM) na indução de embriogênese dos diferentes genótipos.
Depois de um mês de cultura (1 ciclo), com a formação de brotos, estes foram selecionados, cortados e transferidos para o mesmo meio fresco. A cultura de brotos foi mantida em sala de crescimento com temperatura de 26 ± 2°C e com fotoperíodo de 16 horas. Depois de 2 ciclos de cultura os brotos múltiplos foram transferidos para o mesmo meio de cultura acrescentando 100 µM BAP cultivados no escuro. Os explantes foram subcultivados mensalmente
RESULTADOS
Os genótipos Pacovan (AAB) e Lidi(AA), que foram estabelecidos, apresentaram bom desenvolvimento, pouca oxidação e ausência de contaminação nos explantes.
Os genótipos: Terra (AAB), 0116-01 e calcutta quando submetidos a preparação das culturas múltiplas de meristema, apresentaram plantas pequenas e muita oxidação. As cultivares Grande Naine (AAA) e Maçã (AAB) apresentaram bons resultados em todas as etapas.
Os brotos estão sendo cultivados no escuro seguindo o protocolo proposto até a formação de grupos meristemáticos e posteriormente serão transferidos para meio de cultura apropriado para indução de embriogênese e estabelecimento de suspensão celular das variedades utilizadas.
Futuramente o calos formados serão testadas em varias concentrações de 2,4-D (1, 5, 10, 20 e 50 mM) na indução de embriogênese dos diferentes genótipos.
